什么是蜡样芽胞杆菌呢?
蜡样芽胞杆菌是一种能引起呕吐和腹泻的食品致病菌。虽然这两种食物中毒形式通常具有自限性,但偶尔也会导致致命结果。蜡样芽孢杆菌群由炭疽杆菌、蜡样芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、假蕈状芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和韦氏芽孢杆菌这六种密切相关的不同菌种组成。其中,蜡样芽胞杆菌与食源性疾病的关系最为密切。蜡样芽孢杆菌为产芽孢兼性厌氧菌,是一种具有运动能力的微生物。
如何检测食品中的蜡样芽孢杆菌呢?
目前,检测污染食品样品中蜡样芽胞杆菌计数有两种常用方法,即自动化最大可能计数(MPN)TEMPO法和定量甘露醇-蛋黄-多粘菌素(MYP)平板法 (GB 4789.14 - 2014)。
食品质量指标(例如:蜡样芽胞杆菌)的传统计数方法即费力又耗费材料。而食品行业为了达到质量保证目的需要快速检测方法。此外,由于现有检测手段需要在候选微生物的特定生长阶段进行,同时还要考虑诸如稀释因子等因素,使得该过程既耗时又需要一定的技术技能。这就刺激了替代方法和快速方法的开发。
A. 最大可能计数(MPN)法需要进行系列稀释样品的多管接种,且其统计学基础甚至可以实现极低数量目标微生物的定量。但是,这种方法特别复杂;因此,以16 MPN技术为基础开发出一个计算机操作自动化系统(TEMPO;法国Marcy L’Etoile的Biomériux公司出品),该系统能够减少菌群估计所需的工作量。该仪器采用独特的微通道卡片在真空条件下引入样品,自动创建MPN计数所需的系列稀释液。然后将样品加入到含有(已制备)干燥培养基的小瓶中,随后接种到自动真空站中的卡片上。然后将卡片从真空站中取出并按照指示进行培养。培养完成后,将卡片放置在装有检测器的读数站中,该检测器能够测定卡片上特定通道中与生物体生长有关的荧光物质。随后,使用计算机软件自动计算MPN。
B. 定量甘露醇-蛋黄-多粘菌素(MYP)平板法是GB 4789.14 - 2014版收录的方法。
两种方法之间存在良好的一致性
研究人员从不同的零售渠道处共收集到616份样品,分别对天然污染样品(无接种样品)和人为污染样品分别进行检测。
天然污染样品包括鱼制品、肉制品、蔬菜制品、sunsik(一种烘烤谷物与其他食品的粉状混合物)、发酵豆制品、红辣椒制品、含油制品、面包和年糕、即食食品和预制食品。人为污染样品包括特殊用途产品(婴儿配方食品)、酱料制品、红辣椒制品、豆酱制品、发酵豆制品、鱼制品、淹渍品、sunsik、泡菜制品。在95.3%的样品中,两种方法分析结果之间的差异小于1 log(CFU/g)。对于酱油产品、jorim产品、鱼制品等受人为污染的产品,两种方法测定的R2值无显着差异。结果统计分析显示,两种方法之间存在良好的一致性。由于对食品安全的关注日益增加,TEMPO 法的使用可能随之增加。
近一段时间以来,蜡样芽孢杆菌污染食品样品数量急剧增加,为确定食品安全水平,需要及时获得检测结果。然而,目前的标准方法,如MYP平板法,最少需要4天才能获得结果。根据本研究的结果,使用自动化TEMPO系统不仅可以将所需周转时间缩短至1天,而且可以降低对受训人员的要求。该方法还可以借助自动化技术提高结果可靠性并减少人为误差。
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参考文献
Kim H Y, Cho Y S. Comparison of TEMPO BC and MYP Plate Methods for the Enumeration of Bacillus cereus in Various Foods[J]. 2017, 32(4): 249-253.