1、确定参数：实验室质控部门一般会告知能力验证样品基本信息。我们实验是中检院的盲样，参数是单核增生李斯特。
2、确定检测方法：GB4789.30定性检验。
3、确认实验方案：把所涉及的试剂进行排查，查询是否缺某种试剂；整个实验流程按思路整理下来，便于实验操作时记录每天实验完成情况及结果。
4、配置所需培养基：无菌水、LB1、LB2、PALCAM、单增显色板、TSA-YE等其他产品可以去陆桥官网订购。
二、实验操作
1、阅读说明书，水化冻干粉（如下图）：
注意事项：多多少少做了好几次能力验证，这里水化时建议提前准备无菌三角瓶或者无菌袋，分四次水化安培瓶，每次5ml(4＆5ml)。最后收集共40ml混匀备用。
中检院一个参数是2份盲样。两份同时水化。
开取西林瓶时，注意盲样状态是否完好，若是洒落，记得拍照留下证据。
2、实验步骤
2.1吸取25ml水化的样品加入225ml的LB1培养基中，30℃培养24h。如下图：
注意事项：在这里，我们可以先分别分离菌落在PALCAM、单增显色板上， 36℃培养24-48h。看是否有杂菌或者是否无菌生长，给后面实验提供信息（如下图左）。
同时需要带上单核增生李斯特标准菌株ATCC19115（如下图右）。
以及单增系列的辅助标准菌株（见后面）。
这里我们的实验结果：一个平板无菌生长；一个平板菌落典型蓝紫色，类似标准菌株；
2.2从LB1培养基吸取0.1ml加入LB2培养基中，30℃培养24h。如图：
2.3从LB2培养基中挑取一环分离在PALCAM、单增显色板上，培养36℃24-48h，对比之前未选择性增菌的PALCAM、单增显色板。
注意事项：一般定性检测会加干扰菌，经过LB1 LB2的选择性增菌，既增加了单增的目标菌，又抑制了杂菌。所以，这一步很重要。
经过选择性增菌后实验结果：一个平板淡黄色、圆形、光滑、湿润；一个平板菌落典型蓝紫色，类似标准菌株；
2.4用上述的平板进行生化实验，按照试剂条说明书进行。和标准菌株对比如下：
注意事项：在运用生化试剂条鉴定时，可以同时纯化平板中的菌落，进行接下来的生化实验。
2.5其他生化实验
木糖鼠李糖：挑取一单独菌落分别接种木糖与鼠李糖，如下图：
注意事项：以上图片为单增标准菌株以及各种辅助标准菌株的木糖、鼠李糖实验结果。
镜检结果：革兰氏阳性短杆菌，如下图：
注意事项：右图是左图蓝色区域的放大。
过氧化氢实验：阳性，如下图：
注意事项：A是空白，B、C是阳性反应。
溶血试验：
注意事项：1.单增李斯特氏菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环；
2.斯氏李斯特氏菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环；
3.英诺克李斯特氏菌无溶血环；
4.伊氏李斯特氏菌产生大的透明溶血环。
协同溶血试验 (cAMP)：选做项目
注意事项：1.单核增生李斯特氏菌在靠近金黄色葡萄球菌的接种端溶血增强；
2.斯氏李斯特氏菌的溶血也增强；
3.伊氏李斯特氏菌在靠近马红球菌的接种端溶血增强。
三、结果报告
1、根据实验中的现象，对比标准菌株得出实验结果。
2、书写原始记录。
3、按照发放盲样平台中的要求，登录相应网站填写实验数据提交。
注意事项：1.收到盲样，检查包装是否完好，及时登录平台反馈样品信息。
2.实验过程中每个环节进行记录，以便结果分析用；若实验失败，记录的数据方便分析失败原因，积累经验。也可要求平台再次发送盲样，进行二次检测。
3.实验过程中每个环节进行拍照，有些平台需要提交实验图片。
