流动相平衡
新柱子拿到,一般先用甲醇平衡30min,然后甲醇水(甲醇少,水占比大)平衡30-60min,然后用流动相平衡色谱柱。(具体情况可能会根据色谱柱不同有所区别,以上一般是使用最多的反相柱)
平衡注意
我们知道一般色谱柱保留在有机溶剂中,如果您的流动相是含盐的流动相,那么那么千万要注意,用有机溶剂和大比例水的流动相过度,再走含盐流动相。否则会造成盐结晶,堵塞色谱系统。
什么样的样品需要用样品平衡色谱柱
大分量的样品,比如多肽,需要用样品平衡色谱柱
样品平衡目的
是为了将硅胶填料表面具有非特异性吸附的位点饱和。
平衡方法
平衡方法就是进样品。由于一般此类问题的样品分子量都比较大,扩散速度慢,所需要的平衡时间也会比较长。进样时可以多进些针,也可以用浓度更高的样品进样。
怎样说明平衡完毕
当保留时间和峰面积可以稳定时。所以在我们初次使用一根柱子时,如果出现保留时间和峰面积不重复时,很有可能说明,你需要用样品平衡色谱柱哦!!
认真阅读说明书
拿到一根柱子后,要认真阅读说明书,因为上面有保存条件,以及冲洗方式。应该学习后再进行冲洗使用。