1.半微量定氮法
1.1 原理
挥发性盐基氮是指动物性食品由于酶和细菌的作用,在腐败过程中,使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性,在碱性溶液中蒸发出后,用标准酸滴定,计算含量。
1.2试剂
1%氧化镁混悬液:称取1.0g氧化镁,加100ml水,振摇成混悬液。
吸收液:2%硼酸溶液。
甲基红指示液:0.2%乙醇溶液。
次甲基蓝指示液:0.1%溶液。
临用时将上述两种指示液等量混合为混合指示液。
0.0100N盐酸标准溶液或硫酸标准溶液。
1.3仪器
半微量定氮器。
微量滴定管:最小分度0.01ml。
1.4操作方法
将样品除去脂肪、骨及腱后,切碎搅匀,称取10g,置于锥形瓶中,加100ml水,不时振摇,浸渍30min后过滤,滤液置冰箱备用。
预先将盛有10ml吸收液并加有5~6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端,并使其下端插入锥形瓶内吸收液的液面下,吸收5.0ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内,加5ml 1%氧化镁混悬液,迅速盖塞,并加水以防漏气,通入蒸气,待蒸气充满蒸馏器内时即关闭蒸气出口管,由冷凝管出现第一滴冷凝水开始计时,蒸馏5min即停止,吸收液用0.0100N盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定,终点至蓝紫色。同时做试剂空白试验。
1.5计算
2.微量扩散法
2.1原理
挥发性含氮物质可在碱性溶液中释出,在扩散皿中于37℃时挥发后吸收于吸收液中,用标准酸滴定,计算含量。
2.2试剂
饱和碳酸钾溶液:称取50g碳酸钾,加50ml水,微加热助溶,使用时取上清夜。
水溶性胶:称取10g阿拉伯胶,加10ml水,再加5ml甘油及5g无水碳酸钾(或无水碳酸钠),研匀。
吸收液、混合指示液、0.0100N盐酸或硫酸标准溶液分别同1.2。
2.3仪器
扩散皿(标准型):玻璃质,内外室总直径61㎜,内室直径35㎜;外室深度10㎜,内室深度5㎜;外室壁厚3㎜,内室壁厚2.5㎜,加磨砂厚玻璃盖,如图所示。其他型号亦可用。
微量滴定管同1.3。
2.4操作方法
将水溶性胶涂于扩散皿的边缘,在皿中央内室加入1ml吸收液及1滴混合指示液。在皿外室一侧加入1.00ml按1.4项制备的样液,另一侧加入1ml饱和碳酸钾溶液,注意勿使两液接触,立即盖好;密封后将皿于桌面上轻轻转动,使样液与碱液混合,然后于37℃温箱内放置2h,揭去盖,用0.0100N盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定,终点呈蓝紫色。同时作试剂空白试验。
3.计算