一、 方法原理
待测样品经石油醚（沸程30~60 ℃）除油，挥去样品吸附的石油醚后，样品中的人工合成色素（柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、亮蓝、赤藓红、新红、苋菜红）用乙醇：氨水：水（7:2:1）溶液提取。
提取液经蛋白沉淀剂除蛋白，离心后上清液于80 ℃水浴上蒸至近干，用少量水复溶，复溶液经正己烷除油，经SPE净化，采用高效液相色谱仪-二级管阵列检测器检测，通过色谱峰的保留时间和扫描光谱图进行定性，外标法定量。
二、试样制备
去除肉制品中的骨头等不可食用部分后，采用粉碎机将其粉碎。
注意事项
试样制备还要根据检验检测工作的具体目的来确定采样部位
若样品中合成色素含量较高，建议提取时采用均质器进一步粉碎样品以便提取完全。
三、 试样保存
粉碎后的样品于4 ℃保存。
注意事项
试样粉碎后建议尽快取样测试，因4 ℃长时间保存肉制品，肉制品也会变质；若-18 ℃保存可延长样品保存期限，但样品中的水分会有损失，不能代表原样品。
四、 试样提取
称取粉碎后的样品5.00 g于50 mL离心管，加入10 mL石油醚（30-60），涡旋混合30 s，5000 r/min离心5 min，倾去上清液，向残渣中再加入10 mL石油醚（30-60），重复上述操作2次，将样品置于通风橱中挥去剩余的石油醚，待提取。
向残渣中加入10 mL乙醇：氨水：水（7:2:1）溶液，涡旋混合30 s，5000 r/min离心10 min，将上清液转移至另一离心管中，向残渣中再加入10 mL乙醇：氨水：水（7:2:1）溶液，重复上述操作2次，合并上清液；向上清液中加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液各3 mL，涡旋混合后静置20 min，8000 r/min离心10 min，将上清液于80 ℃水浴上蒸至近干，用3 mL水复溶，加入1 mL正己烷，涡旋混合，5000 r/min离心3 min，去除正己烷层，待净化。
将复溶溶液倒入3 cm高的聚酰胺粉小柱（预先采用6 mL甲醇、水依次活化，pH=5的水洗至流出液pH值在5左右），用6 mL水、甲醇依次淋洗小柱，待淋洗液流干，用6 mL乙醇：氨水：水（7:2:1）溶液洗脱，收集洗脱液，并于氮吹仪上吹至近干，用水复溶并定容至5 mL，过0.22 μm水性滤膜待测。
注意事项
若样品中人工合成色素含量较高，应增加提取次数，并采用均质器配合进行提取，以便将样品中的人工合成色素提取完全
对于高蛋白高脂肪的样品，检测过程中需根据蛋白和脂肪的含量对蛋白沉淀剂和正己烷的加入量和除杂次数进行调整
加入蛋白沉淀剂后静置20 min以便于样品中的蛋白沉淀完全
聚酰胺粉小柱活化后，流出液的pH值要达到5附近，以保证人工合成色素能全部吸附在小柱上，没有损失
过滤复溶溶液时一定要用水性滤膜，因有机滤膜对人工合成色素有截留效果，在使用水性滤膜时也要注意观察有没有截留
五、检测
1、标准曲线的配制：精密移取适量的人工合成色素标准溶液，用水稀释，配制成线性范围合适的混合标准曲线。
注意事项：
1）购买标准品时建议直接选择液态的标准溶液，省去固体标准物质称量、溶解带来的不便和误差
2）标准曲线的线性范围根据待测样品溶液中待测组分的含量而定，以降低标准曲线拟合引入的不确定度。
2、样品溶液的检测：按照同标准溶液检测相同的仪器条件进行。因新红、柠檬黄和苋菜红3种人工合成色素在液相色谱中不易分开，将我实验室摸索的液相分离条件提供如下，供大家参考。
色谱柱：TechMate C18，5μm，4.6×250 mm，流速：1.0 mL/min；
梯度洗脱条件
注意事项
检测波长建议大家采用各人工合成色素的最大吸收波长，如柠檬黄采用428 nm检测
检测器建议采用二极管阵列检测器，尽管采用最大吸收波长检测，但还会有出现假阳性的风险，若采用二极管阵列检测器进行检测，同时对光谱进行扫描，通过光谱图进一步定性，以避免发出假阳性报告
