培养基适应性试验的定义:是通过新进培养基与合格培养基的比较,以菌落的生长状态或特征数量客观评价新进培养基是否符合使用要求。
培养基适应性操作大致如下:
1
取相应阳性菌落复苏培养后稀释成含菌量在100CFU以下待用,制备用菌悬液不可放置太久,应尽快使用。
2
按照标准或说明书溶解制备待测培养基并设置对照组,阴性对照等。(商业化的培养基干粉,溶解、灭菌和培养条件等应严格按照厂家提供的使用说明书要求进行操作。)
3
将阳性菌落均匀地涂布在琼脂平板上或直接倾倒于培养基混匀并标记,对照组参照相同方法。根据不同的阳性菌特性,涂布或划线时应轻柔均匀接种至琼脂培养基表面。(液体培养基直接接种至溶液中,应垂直避免菌落贴在试管壁上)
4
将已接中好的培养基放置在对应条件下进行培养。(培养箱的温湿度应符合对应菌种要求)
5
菌落计数结果(平均数):待测组/对照组=0.5-2.0;菌落形态大小与对照培养基一致。(被检测液体培养基管与对照培养基管比较,试验菌应生长良好。)
商业化的干粉培养基的原料多提取自动植物,每个生产批次由于原料的不同培养基颗粒的外观颜色可能会有一定的差距,所以干粉外观判断不是作为放行的首要依据,需要进行培养基适应性实验来判断培养基的有效性。