来自河北科技大学化学与制药工程学院、河北省食品安全重点实验室的田海伟、冯浩彬、李晋等人，建立牛奶中18 种激素类药物残留的高效液相色谱-串联质谱检测方法。使用QuEChERS前处理方法进行净化提取，简化实验前处理过程，提高实验效率。也可以为其他动物源性食品中的兽药多残留分析提供借鉴。
结果与分析
01
提取条件、净化条件、液相色谱条件
实验采用乙腈作为提取溶剂，将PSA、C18 作为吸附剂，选择0.1%甲酸和乙腈为液相色谱的流动相。
02
质谱条件的确立
糖皮质激素在质谱的行为较为复杂，在ESI－可产生[M－H]－、[M＋CH3COO]－和[M＋HCOO]－的负离子，在ESI＋可产生[M＋H]＋的正离子。在负离子扫描模式下，若流动相含有甲酸或甲酸铵则以[M＋HCOO]－为主，若含有乙酸根则以[M＋CH3COO]－为主，若两者都没有则以[M－H]－为主，实验发现负离子扫描模式稳定较[M＋H]＋差。所以方法采用正离子扫描模式。本研究对每种目标物质进行质谱条件的优化，使实验的定量分析更加稳定有效。首先将每种目标物的标准溶液（100 ng/mL），使用针泵流动注射直接进样进行质谱分析，确定其母离子和子离子，为了使每种目标物质的灵敏度达到最佳，在针泵进样过程中需要优化碎裂电压、碰撞电压等仪器参数。每种分析物要选择最强且稳定的离子作为定量离子，另一个则为定量离子。
03
特异性
方法采用MRM模式，提取偏差在±0.005‰范围内的精确质荷比的色谱图进行定量，加上色谱保留时间，方法的特异性高，没有发现有干扰成分影响18 种糖皮质激素的测定。在空白样品和空白样品添加的色谱质谱图中未发现干扰峰，说明方法具有较好的选择性。
04
基质效应、线性、检出限和定量限结果
对前处理净化方法的基质效应进行评价，其中倍氯米松、氟米龙的基质效应最强，为0.96，其余均在0.81到0.96之间。从回收率和精密度结果来看，虽然18 种糖皮质激素均有一定的基质效应影响，但并不影响测定的准确性。有文献研究基质效应在0.80～1.20之间可以不考虑基质效应的影响。
用18 种糖皮质激素的混合定溶液配成系列标准工作溶液，用分析物峰面积与被测组分的质量浓度作图，方法在0.5～100 ng/mL呈线性关系，其线性相关系数（R2）高于0.993 6。以3 倍和10 倍信噪比确定了方法的检出限和定量限，18 种分析物的定量限在0.3～1.1 μg/kg之间。
05
准确度和精密度结果
在3 个水平做了添加回收率实验，考察了方法的准确度和精密度，如表3所示，回收率在73.7%～98.6%之间，精密度在4.9%～12.9%之间。方法具有较好的准确度和精密度。
06
18 种糖皮质激素的测定结果
用实验建立方法检测12 种不同品牌的市售牛奶，在其中1 种牛奶中含有微量的氢化可的松，其余批次的牛奶未发现其他种类的兽药残留。
结 论
通过优化对比实验，探讨提取净化等QuEChERS前处理条件，考察牛奶样品的基质效应，优化QuEChERS前处理条件和质谱条件，研究方法的回收率、检出限和定量限等技术指标，实现了牛奶样品中18 种糖皮质激素的同时检测。实验结果表明，该方法简单快捷、准确可靠，适合于市售牛奶样品中糖皮质激素的快速检测。
