食源性病原体诊断与检测技术的研发和应用已成为预防和减少食源性疾病传播的关键，因此对食品中复杂的混合微生物种属进行及时监测和鉴定越发重要。但是传统的检测方法，如革兰氏染色、菌落培养形态、生理生化特性等都是基于微生物及其生长代谢所表现的性状来识别微生物，通常需要复杂的样品前处理、多步增菌等步骤，这些步骤耗时长，受环境和微生物活性影响大，结果不可靠、不准确。而以PCR技术为主的分子生物学检测技术虽然具有快速、敏感和特异性强的优点，但是仍然存在高成本、潜在的设备交叉污染、高假阳性率、操作繁琐等问题。以上这些制约因素可能导致一系列重大问题，如生产效率低下、库存积压、将有风险的产品放货、损失品牌价值等。
美国Veriflow DNA签名捕获技术，其致病菌和腐败菌检测系统（图1所示）在各种PCR检测技术中脱颖而出、独树一帜，是具有开创性的分子检测技术。这一强大的平台即使在最具有挑战性的样品基质中也能凭借简单的样品准备实现最高水平的检测精确性。
Veriflow?专利的DNA签名捕获技术能将实时PCR测试的灵敏度和基于垂直层析的诊断测试技术的易用性结合，使之能够从复杂的样品基质和环境中快速检测目标分析物的DNA，这项专利被美国第三方检测实验室执行经理评价为“分子诊断领域十年来的第一项突破性新技术”。Veriflow分子层析检测具有灵敏度高和简便易用的特点，通过简化样本准备流程、缩短检测时间和直观的结果判断，为用户提供了各种致病菌、饮料生产和酿酒过程中产生的腐败菌检测的新路径。
高性价比的Veriflow检测系统的组成
Veriflow致病菌和腐败菌检测系统由三部分组成：支持快速反应、可等温亦可变温扩增的小型、客户化的96孔PCR仪、Veriflow全套独立分装试剂盒（包括预处理试剂、PCR试剂管和掌上型的层析卡盒）和Veriflow多光源定量读数仪（仅定量检测时选配）。
简便易用的系统，可现场测试并获得稳定准确的检测结果
DNA签名具有物种特性，且物种越近，签名越相似。同时，签名有局部相似性，物种在某方面也具有相似性，即签名可以表征物种的分类和进化关系。因此，基于PCR检测技术的Veriflow DNA签名捕获技术因其独特的专利试剂不需要纯化样品和提取DNA，也不需要进行离心操作就能检测目标微生物，具有高特异性和灵敏度的优势，可用于各种食品和环境样品中致病菌的定性或定量检测。对于限量为25g不得检出的致病菌一步增菌即可定性；对高污染样品无需增菌即可进行初始菌含量的定量检测。
Veriflow系统仅需简单的样品制备和极简的手工操作，就可以使原本需要2~3天完成的致病菌、腐败菌检测工作缩短至3~24小时内完成，并在缩短检测时间的同时保证准确率，为用户节约了大量实验和培训的时间和费用。
Veriflow分子层析检测套装是美国IS（隐形哨兵）公司专利性、革新性的设计，无需用户自配PCR反应体系，并对抑制剂有抵抗作用，消除了敏感性酶对样品净化的需要，而且扩增不受样品本身自带的环境抑制剂的影响。
Veriflow检测系统不需要进行以凝胶电泳或荧光定量检测为基础的靶扩增，也无需进行复杂的数据分析。掌上型分子层析卡是首个基于垂直流的分子生物学技术，采用DNA签名捕获技术，确保高特异性；垂直流的设计，使无损DNA流经毛细管并成功到达检测线，使检测具有更高灵敏度和更低检测限；消除样液回流造成的假阳性，结果准确可靠；只需要3分钟，检测结果便一目了然：一条线表示阴性，两条线表示阳性（图3所示），无需使用有内在缺陷的光学检测系统，无须清除样品来避免其对光学传感器的干扰。
图3 阴阳性检测结果
AOAC认证和中检报告证实Veriflow更高准确度，更高特异性和更低检测限
Veriflow系统对多达70多种食品的基质、环境采样和各项检测项目包括沙门氏菌属、单核增生李斯特菌、弯曲杆菌属和大肠杆菌O157:H7、产志和氏毒素大肠杆菌、李斯特菌属等测试都进行了大量不同菌株的验证，并获得了美国公职分析化学家协会AOAC的认证，证实了Veriflow具有100%的包容性、100%的排他性（表1所示）。
在AOAC的包容性和排他性实验中，也验证了其具有更高的特异性和更低的检测限（表2所示）。例如，在沙门氏菌属的排他性实验中，准确地排除了枸橼酸杆菌和阴沟肠杆菌这两种在沙门氏菌常规检测中难以区分的菌。
Veriflow获得中国检科院综合检测中心（以下简称“中检”）全面证实的致病菌快速检测系统。中检对猪肉、鸡肉和牛肉、鸡蛋、牛奶、沙拉等多种食品基质中的沙门氏菌属、弯曲菌属、单核细胞增生李斯特菌属和大肠埃希氏菌O157:H7进行了自然样本、添加干扰菌的样本和添加目标菌的样本进行了检测和评估，证实这些检测项目在不同样本基质中的准确度，特异性和灵敏度都达到了100%（表3所示）。
Veriflow系统的用途和应用
Veriflow这一创新性的食源性致病菌检测系统是建立在具有颠覆性意义的新技术基础上，即将经过证实的微生物检验诊断原则和一流的创新科学方法相结合，可以进行沙门氏菌、单核增生李斯特菌、李斯特菌属、弯曲杆菌、大肠杆菌菌O157:H7、产志贺氏毒素大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌等多种食源性致病菌的检测，也可以进行脂环酸芽孢杆菌定量，乳酸菌、小球菌、布鲁塞尔酒香酵母菌、德克拉酒香酵母菌的快速定量检测，广泛适用于食品、饮料、保健品、酿酒和化工业的原材料、中间产品、生产过程中的关键控制点和终产品的快速检测，并已被食品生产企业、全球第三方检测实验室和全球各地的优质酒庄和啤酒厂广泛采用。
Veriflow系统带来了一种新型、超灵敏和用户友好的诊断测试方法，为政府监督部门和企业提供了一种全新的、有效保障食品安全的检测工具。
