灭菌是指杀灭和(或)去除所有微生物及其孢子的过程,是微生物检测过程中的重要环节。在日常的微生物检测中用正确的消毒灭菌方法杀灭微生物,做好灭菌效果的监测和评价工作至关重要。它不仅能够有效地保障实验结果的准确,还关系到生物安全。灭菌效果的评价,可以采用以下方法进行判断。
常用的灭菌效果监测方法
1.生物学检测方法(商品化嗜热芽孢杆菌生物指示剂)
(1)实验操作:
将嗜热芽胞杆菌生物指示剂放入待灭菌物品中,置于压力蒸汽灭菌器经过一个灭菌周期121℃20min/121℃30min后,从压力蒸汽灭菌器中取出嗜热芽胞杆菌生物指示剂,击碎生物指示剂中玻璃管让溴甲酚紫蛋白胨水培养基浸润沾有嗜热芽胞杆菌的纸片,置培养箱中56℃培养7天,观察培养基颜色变化,并记录结果。
(2)结果判定:
1)溴甲酚紫蛋白胨水培养基不变色,判定为灭菌合格。
2)溴甲酚紫蛋白胨水培养基由紫色变为黄色时,判定为灭菌不合格。
2.化学检测方法(商品化化学指示卡)
(1)实验操作:
将3份化学指示卡片放入待灭菌物品包内上、中、下三个部位置于压力蒸汽灭菌器中。经过一个灭菌周期121℃20min/121℃30min后,取出指示卡片,观察卡片上指示色块颜色变化,并与标准色块进行对比,并记录结果。
(2)结果判定:
1)指示色块颜色的深度达到或超过指示卡上标准色块的颜色,表示灭菌合格。
2)指示色块颜色的深度浅于指示卡上标准色块的颜色,表示灭菌不合格。
化学法色块的颜色深浅可能存在判断的误差,在实际的监测过程中还应结合生物法,确保压力蒸汽灭菌器的灭菌效果达到灭菌要求。