1
确认流动相是否新鲜配制的，比例有无错误。
2
确认色谱条件是否在色谱柱使用范围内，如pH范围、温度和压力。
3
仔细观察柱前压的变化。如果压力稳定，可以判断泵系统没有问题。如果压力不稳定，通常是由于泵内有气泡造成的，一定会影响保留时间。将流动相仔细脱气，并排出泵内气泡。
4
观察色谱峰形和柱效变化情况，确认色谱柱是否被污染。如果色谱柱被污染，可使用适当溶剂冲洗。
5
如果同时伴有色谱柱柱压升高，降低柱压。
6
如果使用梯度洗脱，确认平衡时间是否足够长。流动相中使用离子对试剂（烷基磺酸钠等）或固定相为正相硅胶等往往需要更长的平衡时间。
7
确认样品是否过载。
8
组分在色谱柱中保留不够。调整色谱条件，使样品在柱上适当保留。
