1. 高效液相色谱仪；C18不锈钢柱(VP—ODS)150 L×4．6；SPD一10 AVP紫外检测器。
2. 试剂 吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因、罂粟碱标准品，硅钨酸、三氯乙酸、石油醚、乙醚、甲醇、氨水均为分析纯。
3. 色谱条件 柱温：30℃；流动相：甲醇：水=98：2；流速：
mE／min；uV检测波长：216 am。
4. 实验方法
（1）原理 呈游离态的生物碱，多不溶于或难溶于水，而易溶于有机溶剂。生物碱可与酸结合生成盐，易溶于水，而不溶于有机溶剂中，生物碱的盐类在碱性溶液中，生物碱又会游离出来。
（2）标准品的测定 取少量罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因标准品，分别加入1 ml甲醇溶液，待检。
（3）罂粟壳的前处理 取适量罂粟壳加200 ml水煮沸10rain，过滤。滤液待检。
（4）样品的检测 取50 ml汤料及50 rIll加有罂粟壳的滤液，分别用10％HCI调节pH 1．8—2．0，用50 ml石油醚分离样品中脂肪，去掉醚层，将去除脂肪后的样液中加入20％三氯乙酸10 ml沉淀蛋白质，离心分离(4 500 r／min)20rain后，取上清液，加5％硅钨酸5 ml摇匀，使沉淀作用完全，置沸水浴中加热5 min，放冷，离心分离(3 000 r／rain)使之沉淀完全。取沉淀加浓氨水至沉淀完全溶解，然后将溶液转入分液漏斗中，取5 ml乙醚分别振摇提取3次，合并提取醚层，蒸干醚层，然后放人60℃烘箱中挥蒸2 h，取出冷却后加入甲醇定容至2 ml，供色谱分析用。
结果与讨论
1. 空白试验
经实验表明，样品处理过程中加入的试剂除所加乙醚有干扰峰外，其他不干扰待测组分的测定，但所加的乙醚经过烘箱60℃挥蒸2 h后，即可消除干扰峰。
2. 样品处理条件试验 由于火锅汤料中成分较复杂，又含有大量的脂肪和蛋白质，因此用硅钨酸沉淀生物碱前，必须先除去这些成份，用石油醚除去脂肪，用三氯乙酸除去蛋白质，然后用硅钨酸沉淀生物碱，就可以得到满意结果。
3. 仪器分离条件选择 经实验表明，只有当流动相甲醇：水=98：2、柱温30℃、流速1．3 ml／min、检测波长为216 nm时，分离效果较好，可得到满意图谱。
4. 色谱图分析
（1）罂粟壳的鉴定 罂粟壳中所含生物碱有20多种，主要是罂粟碱、码啡、那可丁、可待因、蒂巴因5种，5种物质的保留时间分别为罂粟碱6．89 min、那可丁1．89 rain、吗啡2．15 min、蒂巴因1．71 min、可待因5．65rain。
（2）汤料中罂粟壳的鉴定
在罂粟壳、汤料、汤料+罂粟壳3种试液的分析图谱中，罂粟壳提取液和汤料的色谱图明显不同，主要表现在主成份的保留时间、相对吸收峰面积上，而加有罂粟壳汤料的色谱图正好是罂粟壳提取液和汤料2个色谱图的叠加，说明汤料和罂粟壳的主要成分明显不同，这对罂粟壳的鉴定有重要意义。
