一般情况下,人们先对食品样本进行培养基富集,然后使用快速方法,检测食品中的细菌。识别食品中的细菌时,人们一般先从样本中提取纯培养菌种分离菌,然后使用快速方法。
快速检验方法的类型
选择一套快速检验方法在一定程度上取决于关注的生物体、检验的食品产品和检验目的。快速检验方法包括以下各项:
迷你化生化识别。这些是每次进行15至24项生化检验的一次性装置。由于这项检验的设计意图是识别特定的菌种,所以需要纯培养菌种。可在短至4小时和最多不超过24小时的时间内提供结果。这些装置不使用试管和平板介质,简化了常规程序。
Petrifilm平板计数测试片。一些成套的快速方法工具使用特殊的基质、酶或其他仪器,加快标准微生物方法的速度。Petrifilm平板计数测试片含有一个预备的培养基,将在这个培养基上添加一个样本。样本放置在适当的稀释剂中,然后进行孵化。采用这个方法,可加速检测样本中存在的细菌。该检验装置是一次性的,并且不再需要制作琼脂平板。
荧光4-甲基伞型酮葡萄糖苷酸(MUG)分析检验。进行荧光4-甲基伞型酮葡萄糖苷酸分析检验时,如果出现特殊的酶反应,微生物学家就会知道存在需要寻找的生物体。一套这样的检验工具称为大肠菌检验(ColiCompletetest)工具。这套工具带有圆盘,上面涂有两种化学物质,这些物质会在存在大肠菌群(一般栖居在肠内的杆菌,例如大肠杆菌)的情况下作出反应。样本接种到带有大肠菌检验圆盘的试管内。带有一个蓝色圆盘的试管在一般情况下用于推断大肠菌群的阳性反应,而在紫外线下发出荧光的试管则用于推断大肠杆菌的阳性反应。
胶乳凝集检验。许多快速方法使用抗体,利用一个特定病原体特有的抗体与抗原相互作用,以便进行检验。在胶乳凝集检验中,如果反应为阳性,凝固抗体的胶乳颗粒使细菌凝成块状。
酶联免疫吸附分析(ELISA)检验。酶联免疫吸附分析检验也依靠抗体与抗原的相互作用。最终结果以易于观察的颜色变化的形式出现。人们用酶联免疫吸附分析检验来检测和量化病原体与毒素。
聚合酶链式反应(PCR)检验。聚合酶链式反应检验采用酶来放大一个受试病原体的一部分DNA。进行这样的检验时,并非总是需要纯菌群的分离菌。这种检验的优点是微生物学家可放大少数特定病原体。遗憾的是,这个方法不能区分活的和死的病原体。食品中也含有许多聚合酶链式反应抑制剂。
方法
在进行食品检验之前,必须充分评估每一种检验方法。国际公职分析化学家协会(AOACInternational)通过协作研究验证,批准了食品初步筛查的快速检验方法。使用快速检验方法得出的阴性结果是确定性的结果。使用快速检验方法得出的任何阳性结果必须采用常规方法予以证实。
国际公职分析化学家协会促进开发和使用已经证实的分析方法,以及化验室质量保证计划及服务。国际公职分析化学家协会提供制订化验室检验标准所需的工具和程序。
局限性
由于食品具有复杂性,使用快速检验方法有局限性。蛋白质、脂肪、油脂和其他因素会干扰检验。食品中的正常细菌也会干扰检验的效果。如果食品中的病原体数量少,检测会有困难。
加工食品会改变菌群和细菌构成。通过富集样本可以解决大多数这类问题。但是,富集样本需要时间。这意味着检验可能不会像人们想象的那样快。