荧光分子所处的外部化学环境对荧光强度有直接影响.选择合适的条件不但可以使荧光加强.提高测定的灵敏度.同时.还可以控制干扰物质的荧光产生.改善分析的选择性。分了荧光分析法具有如下特点:
(l)灵敏度高.山于是在黑背景下测定荧光发射强度一般而言，分子荧光分析法的灵敏度比紫外一可见吸收光洪分析法高2~4个数址级.检出限可达0.1--0.001ug.cm-3.
(2)选择性强。既可根据特征发射光谱，又可根据特征吸收光谱来鉴定物质，还可以采用同步荧光光谱和时间分辨荧光光谱测量方法.进一步提高选择性。
(3)试样量少。分子荧光分析法的主要不足是应用范围小，这是由于本身能够发射荧光的物质及能形成荧光测量体系的物质相对较少所致。另外，方法灵敏度高的同时受环境因素的影响也较大。
2.定量依据与方法
荧光强度If正比于吸收的光强度I8和荧光最子产率:
上式即为定贫的依据。常用的定量方法有标准曲线法和比较法。
当被测物质本身能够产生荧光时。可通过直接侧定荧光强度来确定该物质的浓度。但大多数无机和有机化合物本身并不产生荧光或荧光量子产率很低而不能直接侧定，此时，可采用间接侧定法测定。间接测定法有两种方式，一是通过化学反应使非荧光物质转变成荧光物质，如荧光标记法;二是通过荧光猝灭法测定，即有些化合物具有使荧光体发生荧光猝灭的作用，荧光强度降低值与猝灭剂浓度成线性关系，可进行定量分析.
3.应用
无机化合物本身不产生荧光，可与有机荧光试剂配位构成发光体系后测最，约可测盆 60多种元素。测定无机化合物时常用的几种荧光试剂有:8一羟基喹琳、2一羟基一3一萘甲酸、 2.2几二经基偶氮苯及安息香等.被、铝、翩、稼、硒、镁、稀土金属等元素的分析可采用普通荧光分析法。氛、硫、铁、银、钻、镶等元素可采用荧光碎灭法测定;铬、妮、铀、蹄等元素可采用低温荧光法侧定。具有荧光特性的有机化合物、生物及药物化合物可直接采用荧光分析法侧定。目前荧光分析法已成为侧定肾上腺素、青祥素、苯巴比妥、维生素、普鲁卡因等药物的灵敏测定方法。对于不产生荧光的菌族化合物，经浓硫酸处理后，可使其不产生荧光的环状醇类结构变成能产生荧光的酚类结构.然后侧定。对于多组分荧光物质的测定，如果谱峰不相互重亚，则可分别测定;有部分重叠时，也可利用同步扫描方式，通过控制以来提高分辨率。
在分子荧光分析法中，利用激光诱导产生超高灵敏度，已能实时检侧到溶液中单分子的行为，如溶液中罗丹明6G分子、荧光索分子的单分子行为研究等.使该方面的研究工作受到广泛关注。在生物和基因检测方面，由于DNA自身的荧光盆子产率很低而不能直接检测到，但以某些荧光分子作为探针，可通过探针标记分子的荧光变化来研究DNA。典型的荧光探针为澳化乙锭(EB)，Tb3+、吖啶类荧光染料、钇的配合物等也被使用.在基因检测方面.目前也已逐步采用荧光染料作为标记物来取代同位素标记物。
