DK-3001A型顶空进样器检测水产品里的CO的方法

1.原理

样品中的一氧化碳在酸性介质中定量释放，达到平衡时，用顶空进样器取液上气体注入气相色谱仪中，通过甲烷转化器，转化为甲烷，用火焰离子化监测器进行检测。

2试剂和材料

2.1除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水；

2.2标准一氧化碳气体：纯度大于99.9％；

2.3硫酸：20％(V/V);

2.4 Ⅰ-辛醇；

2.5空气：纯度大于99.9％。

3主要仪器和设备

3.1气相色谱仪并配有甲烷转化器；岛津GC14C

3.2均质器；

3.3离心机(4000rpm)；

3.4气密性进样器：10µL、50µL、1mL；

3.5顶空进样器中兴公司DK3001：

顶空瓶100 mL。

4测定步骤

4.1校正曲线的绘制

4.1.1 CO气体浓度系列的配制

4.1.1.1将纯度99.9％的CO气体在常压下充入100 mL的顶空瓶中，及时密封；

4.1.1.2常压下，同样取纯空气6份于100 mL的顶空瓶中，及时密封；

4.1.1.3在装满纯空气的100 mL的顶空瓶中，分别用气密性mL进样器注入99.9％CO 10µL、50µL、100µL、200µL、300µL、500µL，配成浓度分别为0.1µL/ mL 、0.5µL/ mL 、1.0µL/ mL 、2.0µL/ mL 、3.0µL/ mL 、5.0µL/ mL的标准CO气体系列。

4.1.2校正曲线的配制

4.1.2.1在6个100 mL顶空瓶中，先后加入55 mL的蒸馏水、0.25 mL的Ⅰ-辛醇、20 mL的20％硫酸盖紧。抽出1 mL瓶中的液上空气，再分别打入1 mL不同浓度的CO气体(A.4.1.1.3)；

4.1.2.2剧烈振摇混合1min后，静置1h;

4.1.2.3顶空进样器，抽取顶空瓶内液体上方气体1.0 mL，进行气相色谱测定；

4.1.2.4根据仪器响应值峰面积与气体中CO浓度关系，得到校正曲线。

4.2对真空包装内气体的检测

用气密性进样针将1.5 mL空气打入真空包装中，静置15min后，抽取1 mL气体，进样，根据下列所述色谱条件，进行检测。

4.3样品检验

4.3.1称取两份各100g样品(精确到0.1g，去除内脏、骨和皮)，一份为即测样品，另一份为对照样品，袋口微敞，置于4℃冰箱内，两天后待测；

4.3.2将即测样品切碎后，加200 mL蒸馏水，在冰浴下均质1min，作为试验液；

4.3.3将试验液于4000rpm(10℃)离心10min后，吸取上清夜50mL于100mL顶空瓶中，迅速加入5mL蒸馏水，20mL20％的硫酸，1.25mL Ⅰ-辛醇后密封，剧烈混合约2min，静置1h。用顶空进样器抽取顶空瓶内液体上方气体1 mL，进行气相色谱测定。

4.4CO含量变化趋势的检测

4.4.1放置两天的对照样品检测，步骤同A.4.3.2和A.4.3.3；

4.4.2将两次检测结果进行对比。

4.5色谱分析

4.5.1气相色谱条件

a)色谱柱：CarbonxenTM1006PLOT,30m×50µm i.d.,或相当者；

b)检测器：氢火焰离子检测器(FID)；

c)色谱柱温度：50℃；

d)进样口温度：100℃；

e)检测器温度：200℃；

f)镍转化炉温度：375℃；

g)气体流速：氮气(高纯氮，纯度≥99.99％)，15mL/min；

h)进样方式：DK3001顶空进样；

i)进样量：1 mL。

4.5.2气相色谱测定

根据校正曲线，进行定量。在上述色谱条件下。CO的保留时间约为1.195 min，标准品色谱图参见附录A中图A1。

每个样品做2个平行样，结果以算术平均值计。

A5计算

按式(1)计算样品中CO的残留量。 

X＝1.165×A× V/v ×1/16.67×1000…… …… …… (1)

式中：

X—— 一氧化碳(CO)残留量

A—— 试样中测得的色谱峰面积在校正曲线上所对应的CO含量，µL；

V—— 顶空瓶中气相体积，mL；

v—— 气相色谱进样量，mL；                                                                                      

1.165—— 1moLCO气体在常压、20℃时的气体密度，mg/mL；

16.67—— 每取出50ml的肌浆上清夜中所对于样品的质量，g。

6.检出限

本方法检出限(LOQ)为20µg/kg。