组胺 ELISA 试 剂盒酶联免疫法检测组胺(序号:CI004)1.简要信息此试剂盒可用于定量检测样品中残留组胺浓度。一套96孔检测。2.检测原理此试剂盒的检测基础原理是抗原抗体反应。在包被有山羊抗兔IgG的塑料微孔板上操作,组胺标准品,样品,酶耦合物以及兔抗组胺抗体加入到微孔中。在孵育期间,游离的组胺和耦合了酶的组胺竞争性地与抗组胺抗体结合,抗组胺抗体和固定在微孔壁上的羊抗兔IgG结合。没有结合抗体的酶耦合物在冲洗阶段将被冲洗掉。然后加入含变色底物的发展液后,酶使无色的底物转变成蓝色,加入终止液后酶催化的变色反应终止,同时使蓝色物质变成黄色。颜色的浓度和样品中组胺的浓度将反比。然后通过450nm酶标仪读数。反推计算出样品中组胺浓度。3.应用领域此试剂盒可定量检测鱼和葡萄酒等样品中残留的组胺浓度。4.提供的试剂微孔板:96孔(12条×8孔,可拆分)。包被有山羊抗兔IgG标准液(Histamine Std):6个玻璃小瓶。每瓶装有不同浓度的组胺标准溶液(0.5ml容量),分别是0,3.7,11,33,100,300ng/ml100ppm控制液(Control 100 ppm):1个玻璃小瓶。装有1毫升组胺溶液。200ppm控制液(Control 200 ppm):1个玻璃小瓶。装有1毫升组胺溶液。酶耦合物(Enzyme conjugate):1个塑料小瓶。装有0.1ml溶液。抗组胺抗体(Anti-Hstamina Antibody):1个玻璃瓶。装有6ml溶液。20倍浓缩分析缓冲液(Assay buffer 20X):1个塑料瓶装有50mL液体。酰化试剂(Acylation reagent):1个玻璃小瓶装有2ml液体指示缓冲液(Indicator buffer):1个玻璃小瓶装有10ml液体。发展液(Developing solution):1个塑料瓶,装有12mL液体。终止液(stop solution): 1个玻璃瓶。装有10ml溶液。封口胶条:3张5.需要自备的材料及仪器样品准备过程:- 20-200ul和200-1000ul可变微量移液 器及配套枪头- 漩涡振荡器(可选)- 高速搅碎机。- 天平- 三氯乙酸(TCA,10%)检测过程:- 20-200ul的可调微量移液器及配套枪头- 20-200ul的可调多道移液器及配套枪头- 低速混合器500rpm(可选)- 酶标仪(450nm)6.警告和注意事项- 只能用于生物体外检测- 有些试剂含有防腐剂成分。终止液有 刺激性。酰化试剂有毒性。- 取试剂时要小心,避免接触到皮肤,眼 睛,嘴,黏膜。- TECNA网站上可下载安全数据表以供查询。7.试剂盒参数描述 参数平均Bo吸光度 ≥0.6 OD450nmB/Bo 50% 5-50ng/mlC.V.(%) ≤6%鱼样品检测限 1.85ppm葡萄酒样品检测限 0.02ppm8.实验所需时间样品准备时间 试剂操作过程45分钟 135分钟9.特异性针对以下抗生素进行交叉反应测试,结果如下:相关物质 交叉反应率N-酰化组胺 100%N-甲基组胺 2.42%N-乙酰组胺 0.61%1-甲基组胺 0.03%L-组氨酸 <0.005%5-羟基-3-吲哚乙酸 <0.005%L-b-咪唑乳酸 <0.005%1-甲基-4-咪唑乙酸 <0.005%咪唑乙酸 <0.005%5-羟基色胺 <0.005%