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酶联免疫法检测新霉素(产品编号: AB672)1．简要信息试剂内部包含了操作过程和执行ELISA操作的各种试剂原料。试剂盒可以检测牛奶，猪尿，牛尿，以及组织样品。96孔板酶标仪以及单条的酶标仪总共可以检测96个2．介绍新霉素是属于氨基糖苷类药物的一种抗生素，像其他氨基糖苷类药物一样，它也是水溶性的，在低PH值情况下非常稳定，同时也是热稳定。通过抑制蛋白的合成，达到抗菌效果。因为口服不能吸收，只能通过注射给药。EU的标准限是500PPB（肌肉，肝和脂肪），1500PPB（牛奶），5PPM（肾）。3．测试原理测试是通过包被抗新霉素抗体的聚丙烯微孔板上来执行的。然后，标准品，样品和偶合物等都加入到微孔中。在这个反应中，加入的样品和标准品中的新霉素抗体和偶合物发生竞争。培养后，任何没有结合的分子都将被冲洗掉。结合在上面的酶活性取决于酶底物的数量，在第二次培养后，酶就会把无色染料变成蓝色。加入终止液后，蓝色会变成黄色。然后通过450nm读数，阿、颜色的密度和样品中新霉素的浓度成反比。4．提供的试剂微孔板（12×8）：包被有抗新霉素抗体标准液(neomycin std)：1瓶白色瓶盖的浓度为11mg/ml的新霉素标准液0.2ml（塑料瓶）。酶耦合物(enzyme conjugate)：一瓶0.2ml的酶耦合物（塑料瓶）酶耦合物稀释液(enzyme conjugate diluent)：12ml的酶偶合物稀释液（红色盖子玻璃瓶）10倍浓缩的牛奶标准样稀释液(milk standard dilute)：为牛奶校准曲线准备的8mL的稀释液（白色盖子玻璃瓶）稀释缓冲溶液(dilution buffer)：50ml的稀释缓冲液（塑料瓶）10浓缩冲洗缓冲液（washing buffer）：50ml的塑料瓶显色液（Chromogen）：3ml的玻璃瓶（白色盖子）柠檬酸盐缓冲液（citrate buffer）:2瓶12ml的溶液（绿色盖子）终止液（stop solution）：9ml的玻璃瓶（白色盖子）5．实验需要但是没有提供的材料样品准备过程：- 组织均质机，旋转搅拌机- 分析天平- 三氯醋酸（Trichloracetic acid）的3%水溶液- 1M氢氧化钠- 离心机或者滤纸实验操作过程：- 20-200ul的可变微量取样枪以及合适加样头- 20-200ul的多道可变微量取样枪以及合适加样头- ELISA酶标仪- 尖嘴冲洗瓶6．使用者需要的警告和注意点- 只能做提外检测- 试剂包含防腐剂，终止液包含硫酸具有腐蚀性。虽然染色剂和柠檬酸盐溶液是无危害的，但是也包含了操过1%的危险物质。- 取试剂时要小心，避免接触到皮肤，眼睛和黏膜。- 对于专职使用者可以使用索取安全数据表- 不要使用过期的试剂- 不要混合不同试剂盒内的溶液7．处理和存储介绍- 在2-8℃储存，不能冷冻- 把未使用的微孔条放回原来有干燥剂的铝薄袋。8．试剂参数描述 参数平均B0吸光度 ≥0.7 OD450nmB0/B 50%（缓冲液） 90-200ng/ml平均标准值偏差C.V. ≤6%B0/B 50%（牛奶标准品稀释缓冲液） 250-600ng/ml9．整个实验需要的时间样品准备时间 试剂操作过程尿 7分钟 30分钟牛奶 15分钟组织 50分钟10．特异性分析样 交叉反应新霉素 100%庆大霉素 ＜0．1%卡那霉素 ＜0．1%链霉素 ＜0．1%