石蜡PNA提取RNeasy FFPE Kit产品咨询联系电话:020-82569399RNeasy FFPE Kit专为从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA而设计。独特的裂解和孵育条件逆转福尔马林对RNA的修饰。并且裂解缓冲液可将RNA从组织切片中有效释放出来,防止RNA的进一步降解。试剂盒同样使用DNase和DNase Booster Buffer优化,去除基因组DNA的污染。使用RNeasy MinElute离心柱纯化获得的总RNA,洗脱体积可小至10 μl。整个纯化流程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。详细信息性能使用RNeasy FFPE Kit从固定和包埋的样本中纯化获得的RNA的产量比用其他方法更高。回收得到的完整RNA最小可达70 nt,并且几乎没有基因组DNA的污染。用该试剂盒从FFPE样本中纯化得到的RNA片段非常适用于real-time RT-PCR等敏感的下游应用。原理用福尔马林固定组织会导致RNA-RNA和RNA-蛋白质的交联,这会影响RNA在酶学分析中的性能。FFPE样本固定和包埋同样会导致核酸的严重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了独特的裂解和孵育条件来逆转福尔马林对RNA的修饰。裂解缓冲液能使RNA从FFPE组织样本中有效释放,并防止进一步的RNA降解。经优化的条件能纯化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit从FFPE样本中得到的RNA的产量比其他方法更高。操作流程整个RNeasy FFPE操作流程可在85分钟内完成。使用蛋白酶K裂解样本仅需15分钟。裂解后,样本在80ºC下孵育15分钟。之后,用DNase处理能有效去除样本中的基因组DNA,包括小的DNA片段。最后,使用RNeasy MinElute离心柱即可收集纯化的RNA,洗脱体积14–30 µl。纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。应用RNeasy FFPE Kit可纯化FFPE 样本中所有大于70 nt RNA,得到适用于RT-PCR等众多下游应用的RNA片段。但是,从FFPE样本中纯化得到的RNA会严重片段化,不能用于需要完整RNA的下游应用。如果使用片段化RNA可能需要做些修饰(例如在RT-PCR时设计小的扩增子)。进行cDNA合成时,不能使用oligo-dT引物,而要使用随机或基因特异性引物。技术参数
特点 | 参数 |
Applications | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
Elution volume | 14–30 µl |
Format | Spin column |
Main sample type | FFPE tissue samples |
Processing | Manual (centrifugation), automated (QIAcube) |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
Sample amount | 1*5 µm to 4*10µm sections |
Technology | Silica technology |
Time per run or per prep | 70 minutes |
Yield | Varies |
数量 | 产品 | 价格 |
RNeasy FFPE Kit (50) 50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes, Proteinase K, RNase-Free DNase I, DNase Booster Buffer, RNase-Free Buffers, RNase-Free Water | 询价 |