使用说明书
【产品简介】
硝基呋喃类药物因有非常好的抗菌作用和药动力学的特性,曾经被广泛应用,作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。呋喃唑酮在1995年被禁用。
呋喃唑酮代谢物快速检测卡具有方便、快速、灵敏等特点,适用于动物组织(水产、鸡、猪、牛)、牛奶等大批量样品中的呋喃唑酮代谢物快速检测。
【测定原理】
本检测卡含有被事先固定于硝酸纤维素膜测试区(T)的抗原和控制区(C)的Ⅱ抗以及固定于结合垫上的金标抗体。样品经简单前处理,取上清液滴入检测卡的样品孔中,若样品为阴性,在T区出现一条紫红色条带;若样品为阳性,则T区不会出现紫红色条带。无论样品中有无AOZ存在,C区都会出现一条紫红色条带。
【规格】 40T/盒
【检测限】 1ppb(ng/g)
【产品组分】
1) 快速检测卡(内装干燥剂、滴管) 40份
2) 衍生试剂 1瓶(10mL / 瓶)
3) 2X浓缩样品稀释液 1瓶(12 mL / 瓶)
4) 使用说明书 1份
【仪器与耗材】
仪器:天平、离心机、氮吹仪(或吹风机)、微量移液器、涡旋震荡器(选配)、均质机、恒温箱;
耗材:50ml离心管、一次性枪头、乙酸乙酯、正己烷、1M 盐酸溶液(HCl)、1 M 氢氧化钠溶液(NaOH)、0.1M 磷酸氢二钾溶液 (K2HPO4)
【样品制备】
样本前处理需配制:
配液1、 0.1M 磷酸氢二钾溶液 (K2HPO4)
称11.4g K2HPO4·3H2O加去离子水溶解定容至500ml。
配液2、 1M HCl溶液
取8.6ml浓HCl加去离子水定容至100ml。
配液3、 1M NaOH溶液
称取4g NaOH加去离子水定容至100ml。
配液4、 1X样品稀释液
吸取1ml的2X浓缩样品稀释液+1ml去离
子水混合,(或按所需用量配制)。
样本前处理步骤:
水产、组织、蜂蜜、奶粉(牛奶)
1、 取3±0.05g均质样本,加入 4ml的去离子水,0.5ml1M HCl和200µl衍生化试剂,充分振荡。
2、 置于37℃恒温箱孵育过夜(大约16h)或56℃水浴中孵育1h以上;
3、 分别加入5ml 0.1M K2HPO4, 0.4 ml 1M NaOH和5ml
乙酸乙酯,充分振荡2min;
4、 在室温下(20-25℃)4000r/min以上离心10min。
5、 取出2.5ml的乙酸乙酯到另一洁净容器中于50℃氮气/空气吹干。
6、 用1ml正己烷溶解干燥物,用0.5ml已稀释好的复溶液充分混
合30s; 在室温下(20-25℃)4000r/min以上离心10min。
7、 取50µl下层用于分析。
【操作步骤】
1、在进行检测前先完整阅读使用说明书,使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。
2、从原包装袋中取出检测卡,打开后平放在桌面上,请在1小时内立即使用。
3、用滴管吸取待检样品提取液后,垂直滴加3滴无气泡样品(约80μl)于加样孔中。见图1
图1 加样示意图
【结果判定】
加样后开始计时,在5-10min内,用肉眼观察测试区和质控区,判断结果,其他时间判断无效。见图2
图2 结果判定示意图
阴性:质控线(C线)和检测线(T线)出现红色条带;表明样本中不含有AOZ或是含量低于1ng/g(1ppb);
阳性:质控线(C线)出现红色条带,而检测线(T 线)无红色条带出现,表明样本中AOZ含量在1ng/g(1ppb)以上;
无效:质控线(C线)与检测线(T线)均无红色条带出现或者质控线(C线)无红色条带出现但检测线(T线)有红色条带出现;说明此试剂卡已失效、过期,或操作不当,需另做一次测试。
【注意事项】
1、请按照操作步骤进行测试,操作时请勿触摸试纸显示区;
2、如购买时发现过期,破损,污染,无效的产品,请到购买处进行更换;
3、本品为一次性产品,检测卡启封后,立即使用;请勿重复使用;
4、样品从冰箱中取出或经处理后,请勿立即加到样品孔中,应待样品温度恢复至室温(20±5℃)后,再进行检测(肉样的温度不高于25℃);
5、不能用水或其他液体作为阴性样品检测对照;
6、本品为样品初筛试剂,若遇到判定结果有争议的样品,请用仪器方法作进一步确证;
【储存】
原包装应储存于2~30℃,阴凉避光干燥处,切勿冷冻和日晒。
【有效期】
有效期12个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装。