*一次性塑料计数板,具有两个细胞入口, 细胞计数网格镶嵌在细胞计数板的主体上.
*计数网格四个角的方格作为细胞计数室, A (左上), B (右上), C (右下), and D (左下).
*每个细胞计数室长度为1.00mm (粗网格线中心和细网格线中心之间的距离),载片与盖片之间的缝隙高度是0.10mm. 因此每个细胞计数室的体积是1mm *1mm *0.1mm =10-4 ml.
使用说明
(1) 充分混匀细胞,将细胞悬液滴加在两个细胞入口处。
(2) 放在显微镜下静置1-2分钟等待细胞附着在计数板上。
(3) 按照A → B → C → D 的顺序对每个细胞计数室的细胞进行计数后加和。
(关于网格线上的计数规则清参照下图以及注释(2))
(3) 细胞密度(Cell Density)通过以下公式计算得到,N是四个细胞计数室的
(4) 细胞总数.
Cell Density = (N/4) x 104 cells/mL
(*)对于计数前经过稀释的细胞悬液,要将上式计算所得的细胞密度乘以稀释倍数。.
注意
○ count ● not count
(1) 为了将误差最小化,四个计数室中的细胞均应被计数. 只计数一个细胞室会增加误差的机会,.
要取得更加正确的数值可以将细胞加在两个细胞入口,并取两个N值的平均值。
(2) (边界线细胞计数规则)
细胞计数室上的方格边线上,细网格线上的细胞应该计数,粗网格线上的细胞则不要计入,例如细胞计数室A(见右图)
(3) 为了提高计算细胞存活率,操作者应该在染色后20分钟内完成计数(对于对染色液敏感的细胞应在5分钟内完成)。细胞在染色液中时间过长会增加死细胞的数量。.
(4) 气泡在细胞计数室中偶尔会出现,如果加样后细胞在计数室中停留时间过长,就有可能出现气泡干扰计数结果。
(5) 细胞计数室具有经过预处理的表面,操作者不能重复使用计数板,因为在一次使用后计数室表面特性改变,重复用后会带来不正确的计数结果。
(6) 为了储存没有用过的计数板,.操作者应将其放入密封的保险袋中,不要将用过的塑料板装进原来的塑料袋中。
(7) 在室温下保存,高温会改变计数室表面的特性。
(8) 实验室专用,非临床,治疗,诊断用途。