美国爱荷华州立大学动物科学系
安东旭教授主要从事家禽产品包括禽肉和鸡蛋的基础和应用研究。主要研究成果为烤火鸡和辐照鸡胸肉粉红色问题机理和特性研究，肉和肉制品的氧化机制及油脂氧化控制方法研究，辐照肉及肉制品中产生异味的挥发性物质鉴定及其异味产生机理研究等。此外，他还研究了维生素、ω3-脂肪酸和共轭亚油酸对肉、蛋品质及蛋白质氧化的影响。近15 年来，他还致力于提高鸡蛋和鸡蛋产品价值和用途的研究。他开发了高效率的分离方法，包括蛋清中的卵转铁蛋白、溶菌酶、卵白蛋白、卵黏蛋白和卵类黏蛋白和蛋黄中的卵黄高磷蛋白、IgY和磷脂。利用分离的成分，开发功能生物活性化合物，可用于抗菌药物、营养剂或药剂，提高鸡蛋价值和利用率。安博士广泛参与许多不同层次的国家和国际活动。研究成果发表论文300余篇，先后获家禽科学协会家禽科学成就奖，美国动物科学学会肉类研究奖，2 次获得美国禽蛋委员会优秀研究奖。
报告题目
卵黄高磷蛋白酶解产物的功能特性
摘 要
卵黄高磷蛋白是自然界中磷酸化程度最高的蛋白之一，存在于脊椎动物的卵黄中。卵黄高磷蛋白磷酸肽具有抗菌、抗氧化、抑制细胞分化、抗炎等多种生物学活性。本研究测定了卵黄高磷蛋白水解产物的功能特性、细胞毒性和血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme，ACE）抑制活性。卵黄高磷蛋白经巴氏热预处理后，分别用胰蛋白酶、碱性蛋白酶Protex 6L、Multifect 14L PR酶、胰蛋白酶+Protex 6L、胰蛋白酶＋Multifect 14L PR在最佳pH值和温度条件下水解6 h。运用MTT法测定卵黄高磷蛋白水解产物对人癌细胞的毒性。以底物Hip-His-Leu中马尿酸的释放量为指标，通过分光光度法和HPLC法测定ACE抑制活性。SDS-PAGE显示从卵黄高磷蛋白到染色线各种谱带，说明预处理产生了不同大小的肽。预处理后单酶处理将这些肽水解成分子质量为10～20 kDa的小肽。两组复合酶的水解程度更高，可获得大量分子质量低于2 kDa小肽。卵黄高磷蛋白铁结合活性显着高于其水解产物。水解产物铁/铜结合活性因酶的种类而异，能显着提高钙在磷酸盐缓冲液中溶解性，对油乳液体系中铁诱导的氧化有很强的抑制作用。此外，对各种人癌细胞有显着毒性作用。其中AGS细胞对卵黄高磷蛋白水解产物最不敏感，而MCF-7和HT-29细胞的敏感性最强。培养48 h后，5 mg/mL卵黄高磷蛋白水解产物对MCF-7和HT-29细胞的毒性为74.06%～88.74%。胰蛋白酶＋Multifect 14L PR水解产物在0.625 mg/mL浓度下对MCF-7和HT-29细胞具有很强的毒性作用（超过70%），还具有较强的ACE抑制活性，在2 mg/mL浓度下能抑制70%以上ACE活性，而卵黄高磷蛋白的抑制率在10%以下。HPLC分析表明，与其水解物相比，卵黄高磷蛋白能从底物中释放更大量的马尿酸（133.91 μmol/样品）。各种酶处理中，胰蛋白酶＋Protex 6L产生最低马尿酸释放量（18.42 μmol/样品），其他各处理之间无显着差异。上述结果表明，卵黄高磷蛋白水解产物被用作人类抗癌药物和新型ACE抑制剂的潜力巨大。
