浙江工商大学食品与生物工程学院
学习经历：
1993年9月至1997年6月，浙江工商大学，本科；
1997年9月至1999年12月，浙江工商大学，硕士；
2000年3月至2003年4月，浙江大学，博士。
工作经历：
2000年3月至2002年12月，浙江工商大学食品与生物工程学院，讲师；
2003年1月至2008年12月，浙江工商大学食品与生物工程学院，副教授；
2009年1月至今，浙江工商大学食品与生物工程学院，教授、博导。
研究方向：
食品生物技术、食品质量与安全、基因工程与代谢工程。
获得荣誉：
浙江省新世纪“151”人才、浙江省高校优秀青年教师资助计划入选者。
科研成果：
先后承担国家级项目1 项、省部级项目7 项和厅局级项目3 项。获教育部提名国家科技进步二等奖1 项、浙江省科技进步奖3 项、中国商业科技进步奖2 项、浙江省高校优秀科研成果奖2 项，授权国家发明专利8 项。以第一作者或通信作者在国内外学术期刊上发表论文110余篇，其中40余篇被SCI收录（TOP期刊论文19 篇，Nature子刊论文1 篇，IF＞5.0的论文12 篇），20余篇被EI收录。担任8 个国内外学术期刊编委和20余个国际学术期刊的特约审稿人。目前是浙江省生物化学与分子生物学会理事，浙江省食品学会理事，中国微生物学会会员，美国化学会会员，杭州市质量技术监督局食品安全风险防范专家，浙江省质量技术监督局保健食品评审专家，浙江省环境保护厅环境影响评价专家，浙江省环境保护厅清洁生产专家组成员，杭州市铁皮石斛专业委员会秘书长，杭州市食品药品监督管理局“十二五”规划专家组成员，国家自然科学基金学科评议组专家，国家科技奖评委。
报告题目
极大螺旋藻藻蓝蛋白cpcA的组合生物合成及其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制
摘 要
根据极大螺旋藻（Spirulina maxima）藻蓝蛋白α亚基的生物合成途径，利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术从极大螺旋藻基因组DNA中克隆了与其生物合成相关的5 个基因：藻蓝蛋白α亚基蛋白基因（cpcA）、血红素氧化酶基因（hox1）、藻蓝素：铁硫蛋白氧化还原酶基因（pcyA）、藻蓝素裂合酶基因E（cpcE）和藻蓝素裂合酶基因F（cpcF），并将这些基因用相应的限制性内切酶酶切后，依次构建到表达载体pETDuet-1的2 个外源基因表达盒内，转化Escherichia coli BL21（DE3），经氨苄青霉素抗性筛选，得到工程菌ZJGSU02。经测序确认，连接到pETDuet-1上的5 个基因拼接正确。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG）诱导后，工程菌培养液中的细胞呈现明显的蓝色，对照菌颜色没有发生变化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）电泳结果显示，在21 kDa处有一明显的条带。重组蛋白经锌离子溶液浸泡后，在紫外光激发下呈现桔色荧光。Western blot分析表明，重组蛋白能特异性地与6×His-tag单克隆抗体结合。通过吸收光谱和荧光光谱检测，发现重组蛋白最大吸收波长为623 nm，最大荧光发射波长为645.8 nm，与天然极大螺旋藻中藻蓝蛋白α亚基的最大吸收波长和最大荧光发射波长一致，以上结果表明极大螺旋藻藻蓝蛋白α亚基已在大肠杆菌中成功实现异源表达。进一步研究了纯化的cpcA诱导人直肠癌细胞凋亡的分子机理。荧光显微镜和透射电镜观察表明cpcA处理后的人直肠癌细胞出现了典型的细胞凋亡特征：细胞核浓缩和染色质片段化。cpcA处理后的人直肠癌细胞中Bax/Bcl-2比例上调、线粒体膜去极化、细胞色素C释放，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9激活，最终导致细胞凋亡。研究结果不仅为色基结合蛋白这类复杂蛋白在异源宿主系统中的表达提供新的思路和方法，而且也为探索在一个表达载体上构建和表达5 个或5 个以上的外源目的蛋白基因及其基因互作等方面的研究提供借鉴，同时为进一步通过转录组学阐明cpcA诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理提供了良好基础。
